Técnicas de hibridación - Diabetes mellitus 2

HIBRIDACIÓN MOLECULAR

La hibridación molecular es importante porque mediante técnicas se ha diseñado para identificar determinadas secuencias en los ácidos nucleicos.

Los métodos de hibridación se basan en el proceso de renaturalización de dos cadenas sencillas de ácido nucleico, muestra o diana, con una sonda marcada de secuencia conocida, que bajo condiciones experimentales permiten el apareamiento entre bases complementarias. El método de detección de los híbridos formados depende del marcaje empleado en la sonda. [1]

Técnica de Southern Blot

 El ensayo Southern Blot  es eficaz porque permite descubrir secuencias génicas específicas y mutaciones responsables de enfermedades genéticas, así como de ciertos agentes infecciosos. La ejecución de este ensayo implica seccionar el ADN en fragmentos que contengan la secuencia o la mutación de interés, para lo cual se utilizan enzimas de restricción. Mediante electroforesis en un gel de agarosa, los fragmentos se separan por tamaño y se transfieren a una membrana de nylon o de nitrocelulosa, con la finalidad de obtener una réplica del gel. Luego, la membrana se incuba con el gen clonado o con una sonda oligonucleótido complementaria, de manera que se produce la hibridación de los fragmentos de ADN que contienen la secuencia genómica analizada. [2]

Bibliografía

1. Adams Villalón Y, Bencomo Hernández A, Rodríguez Leyva R, Aquino Rojas S, González Díaz I. La biología molecular en el estudio de la inmunopatología [Internet]. Scielo.sld.cu. 2014 [cited 28 May 2017]. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-02892014000400003

2. Villegas V, Sánchez M, Chuaire L. Reacción en cadena de la polimerasa y diagnóstico molecular [Internet]. Colombia médica. 2010 [cited 28 May 2017]. Available from: http://bibliotecadigital.univalle.edu.co/bitstream/10893/3325/1/polymerase.pdf